Полимеразная цепная реакция (сокращенно - ПЦР) - один из самых современных методов определения гепатита С в крови. Анализ ПЦР на гепатит С позволяет не только выявить болезнь, но еще и определить ее стадию, вне зависимости от срока заражения. Таким образом, вы будете осведомлены не только о наличии вируса, но и о степени развития болезни.

Преимущества анализа на ПЦР перед другими методиками диагностики

Антитела, присутствующие в крови человека, даже профессиональному врачу заметить непросто, особенно если их концентрация мала. Достоинство полимеразной цепной реакции состоит в том, что данная методика вычисляет вирус даже на самых ранних стадиях развития. Среди преимуществ этой методики диагностирования врачи особенно отмечают следующие:

она считается одной из самых точных, позволяет вычислить даже малую концентрацию антител в крови;
ПЦР-анализ показывает результаты даже спустя 7–8 дней после заражения, в отличие от общего и биохимического анализа крови;
для проведения необходима лишь кровь пациента, а значит, отпадает необходимость добывать ткани печени, как при другой эффективной методике диагностирования - биопсии;
по РНК вируса можно не только поставить точный диагноз, но еще и определить его стадию.

С помощью современных методик врачам удалось изучить РНК вируса гепатита С. При подозрении на такой диагноз специалисту необходимо взять кровь и провести качественный и количественный анализ ПЦР РНК вируса. Нужно понимать, в чем отличие между качественным и количественным анализом.

С помощью первого варианта удается поставить диагноз, а благодаря второму определяется стадия болезни. Так, если в крови присутствует РНК вируса, можно сказать, что человек страдает от гепатита. Однако лишь количественная диагностика поможет определить, когда произошло заражение и какое лечение подойдет человеку в данном случае.

Сама болезнь считается крайне коварной, ведь она может развиваться без видимых симптомов. Именно поэтому врачи всегда проводят лабораторную диагностику, изучая кровь, а также мочу и иногда кал пациента.

Если и после полимеразной цепной реакции остаются сомнения в правильности поставленного диагноза, врач будет вынужден прибегнуть к биопсии печени. Эта методика подразумевает забор печеночной ткани с помощью специальной иглы и ее тщательной изучение.

Качественный анализ ПЦР

Обнаружение РНК гепатита С в крови - дело не самое простое, поскольку здесь важна внимательность и опытность врача. Часто специалисту не удается заметить малую концентрацию вируса, из-за чего ставится ложноотрицательный результат. Кстати, такой ложный диагноз не является редкостью. По каким еще причинам он может оказаться неправильным:

Если кровь забиралась в неподобающих условиях.
Прием «Гепарина» пациентом в большинстве случаев приводит к ложным результатам исследования.
Попадание в биологический материал веществ из окружающей среды тоже может обернуться постановкой ложного положительного диагноза.

Именно поэтому забор крови нужно осуществлять осторожно и внимательно. При таком исследовании никаких особых мер соблюдать не нужно. Обычно врачи рекомендуют избегать приема большого количества медикаментов перед проведением анализа и отказ от алкоголя непосредственно перед исследованием.

При помощи ПЦР гепатит С не всегда удается выявить. Несмотря на точность этой методики, она дает результаты лишь спустя неделю после заражения. Если же проводить диагностирование раньше, велик риск получения отрицательного результата.

Если врачу удается обнаружить антитела даже в минимальной концентрации, то ставится положительный результат. Для его подтверждения врач может взять кровь на биохимический анализ. При наличии антител гепатита С биохимический анализ должен показать повышение билирубина в крови и присутствие ферментов АСТ и АЛТ.

Если по результатам ПЦР вирус есть, а остальные анализы показывают его отсутствие, врач может направить человека на биопсию. Данное заболевание считается крайне опасным и коварным, поэтому от гепатолога требуется максимальная точность.

Количественный анализ и его расшифровка

Если у пациента не обнаружено РНК вируса, он может вздохнуть свободно. Однако если полимеразная цепная реакция дала положительный результат, врачу придется сделать еще и количественный анализ.

Расскажем, что такое количественный анализ крови при гепатите. Его смысл в том, что врач определяет концентрацию вируса в крови. Чем выше эта концентрация, тем опаснее и запущеннее заболевание.

Как расшифровывается такой анализ:

При гепатите С ПЦР отрицательный может быть показан из-за индивидуальных особенностей организма человека. Так, если человек принял большое количество лекарств перед сдачей анализов или использует гормональные препараты, результаты могут оказаться неточными. Особой трактовки требуют анализы, взятые у женщины, которая находится на первом триместре беременности. В таком случае ПЦР анализ может показать слишком большую концентрацию вируса.

Все эти нюансы должны учитываться при диагностике гепатита. Хороший врач может заметить антитела даже в небольшой концентрации и поставить диагноз.

При гепатите В, А ПЦР диагностика обычно не проводится. Это исследование актуально именно для болезни группы С.

С помощью анализа можно определить антитела даже в малой концентрации на ранней стадии развития проблемы. Однако ПЦР диагностику на гепатит С должен проводить исключительно опытный врач, обладающий достаточной квалификацией для правильной трактовки результатов.

Специальное лабораторное исследование - анализ пцр на гепатит с - значительно упрощает диагностику этого вирусного заболевания. Исключением не является и гепатит С. Небольшая по объему проба крови может быть проверена на содержание рнк и другой генетический материал вирусного агента. Анализу с проведением пцр подвергаются все лица с циркулирующими в плазме крови антитела к гепатиту С, наличие которых подтвердило качественное обнаружение.

Расшифровка результатов интерпретируется в графе бланка исследования как «положительный» или «отрицательный» анализ. Кроме этого, с помощью пцр возможно не только качественно определить минимальное содержание вируса, но и подсчитать число частиц. Таким образом, можно определить предполагаемую вирусную нагрузку и максимально точно определиться с врачебной тактикой лечения.

Печень как элемент пищеварительного тракта принимает на себя огромную нагрузку. В ее клетках происходит большинство метаболических реакций всех видов обмена, что обеспечивает оптимальное функционирование всех органов и систем. В тоже время велико ее детоксикационное значение для выведения шлаков и продуктов обмена с ферментативной желчью.

Своевременная диагностика заболевания затрудняется скрытой клинической картиной и бессистемностью патологии. Положительный результат может быть просто упущен некачественным выполнением анализов. Только значительное поражение клеток печени вызывает определенную симптоматику, однако, отрицательный эффект виремии к тому времени не оставляет шансов восстановить орган.

Современная медицина разработала специальные методы распознавания малейших следов вируса. Пцр, ифа, биопсия печени позволяют распознать малейшее повреждение печени и минимальный уровень антител против вируса. Анализ cпомощью пцр наиболее прост и достоверен в диагностической практике.

Качественный анализ

Суть полимеразной реакции заключается в наработке последовательности рнк. Реакция выполняется при наличии в плазме крови таких же вирусных белков.

Специальные катализаторы позволяют синтезировать сходную вирусной последовательности цепь, которую сравнивают с известными нуклеотидами вирусной рнк. На основе этого и определяют вирусную нагрузку и поражение печени.

Исследование методом ПЦР открывает больше информации, чем простое обнаружение рнк вируса. Она превосходит по чувствительности некогда стандартные методы ифа и другого вирусного выделения в несколько раз.

Пцр способна уловить даже единичное присутствие искомого гена во взятой крови. Такая диагностическая цепная реакция также весьма специфична. Последовательность нуклеотидных цепей уникальна для каждого существа, так что ферментативные праймеры создают идентичные последовательности искомой генетической информации. Таким образом, можно с малейшей точностью выявить любой вирус, даже если его количественный показатель чрезвычайно мал.

Пациентам, в крови которых были обнаружены выработанные , проводят качественное исследование пцр или ифа. Результат анализа может быть как положительный, так и отрицательный, что в обоих случаях требует лечения.

Расшифровать положительный ответ цепной реакции следует как наличие фрагментов рнк гепатитного вируса или как явление инфицирования.

Отрицательный анализ можно получить и в следующих случаях:

При взятии материала в ненадлежащих условиях, получении пробы крови с загрязнениями;
При ранее произведённых пациенту инъекциях гепарина.
При присутствии во взятых образцах других ферментов и субстратов, нарушающих ход цепной реакции.

Количественный анализ

Количественный тест как микробиологическая диагностика призван определять вирусную нагрузку. Подтвержденный качественный анализ на виремию служит основанием для определения количества генетического материала и его концентрации. Число выявленных вирусных рнк определяют в единице объема крови, обычно в 1 миллилитре. Искомые материалы выражают в международных единицах, некоторые лаборатории в анализах ифа используют количество копий.

Обычно до проведения любой терапевтической схемы проводится количественный анализ пцр. Подсчет вирусных рнк проводят достаточно часто: спустя одну, четыре, двенадцать и двадцать четыре недели. 12-ая неделя считается показательной, так как на основе анализа в этот период проводится расшифровка эффективности лечебных мероприятий.

Любое проведение исследований не требует тщательного подготовительного этапа пациентов. Единственное, что запрещается до взятия крови – курение.

Количественный анализ с помощью пцр или ифа предполагает взятие проб из вены.

Интерпретация результатов как высокая вирусная нагрузка начинается от цифры в 800000 МЕ/мл. Такой положительный результат на гепатит С отражает наличие не менее 3000000 копий в одном миллилитре крови. Низкий уровень виремии останавливается на цифре в 400000 МЕ/мл. Результатами исследования могут быть значения как отрицательный ответ, а также показатель «ниже измерительного диапазона».

Количественный тест с оценкой «ниже диапазона измерений» говорит, что в ходе реакции не удалось произвести подсчет рнк. Вирус же в организме все же циркулирует, на что указывает положительный качественный тест. Отрицательный показатель количественного анализа пцр или ифа свидетельствует об отсутствии рнк в данной пробе крови.

Вирусная нагрузка позволяет расшифровать степень инфекционности патологии и опасность пациента для окружающих. Высокий уровень вирусных рнк, выявленных в ходе пцр или ифа, говорит о риске «заразности» больного.

Несмотря на ограниченные способы передачи вируса через кровь, повышается риск передачи вируса через секреты половых желез, от матери к ребенку.

Количественный анализ оказывает существенную помощь в оценке терапевтических мероприятий. Ифа и пцр отражают действие противовирусных лекарственных средств, помогают установить сроки терапии и оценить формирование иммунитета больных. Скорый отрицательный ответ лабораторных тестов свидетельствует об успешном лечении и необходимости сократить сроки терапии. Медленное снижение показателей виремии можно расшифровать как необходимость видоизменения терапевтического курса. Уровень вирусной нагрузки определяет и прогноз заболевания. Гепатит с низким данным показателем, скорее всего, будет просто лечить и можно полностью вывести вирус из организма. Высокие показатели вирусного присутствия в крови требует внимательного отношения и разностороннего лечения.

Вирусная нагрузка — это количество или содержание в крови больного вирусных рибонуклеиновых кислот (генетического материала). Опираясь на количество найденных клеток РНК, можно стадию развития вируса и не инфицирует ли он новые клетки. Этот тест должен проводиться в случае, если у больного обнаружены антитела на ВГС. Количество клеток с генетическим материалом измеряется на один миллилитр крови. После проведения такого теста вы узнаете вы узнаете о собственном диагнозе «гепатит С», либо отсутствии оного.

Применяется тестирование следующих типов:

Применение таких способов диагностики начали относительно недавно, но высокая точность и качество исследований уже доказаны.

Тестирование

Количество содержащегося в крови генетического материала и является вирусной нагрузкой. В случае, когда установленное число вирусных клеток велико, можно судить о происходящем процессе поражения здоровых клеток. Соответственно, терапию пациенту нужно составить таким образом, чтобы поскорее добиться периода ремиссии и остановить заражение.

Во врачебной практике оценка вирусной нагрузки обычно проводится, если у больного обнаружили количество антител, превышающее норму. Для того чтобы определить количество РНК используют три метода.

1. ПЦР или полимеразная цепная реакция способна обнаружить даже очень небольшое присутствие вируса гепатита.

Высокочувствительный метод стал самым популярным и востребованным у людей, которым поставили диагноз «подозрение на гепатит С». ПЦР увидит антитела, которые выработались организмом в ответ на заражение, даже если их пока очень мало. Не инфицированный человек получит отрицательный результат, поскольку ни антител, ни генетического материала ПЦР не обнаружит.

Когда у пациента присутствует РНК, значит доктор назначает адекватные терапевтические процедуры и медикаменты для излечения присутствующего вируса, также проводит дополнительную диагностику (как минимум УЗИ печени и взятие биологического образца тканей печени).

2. Метод разветвленной ДНК. Он на порядок дешевле по стоимости, чем предыдущий тест, поэтому практикуется в гослабораториях для определения диагноза. Он удобен тем, что дает возможность выяснить, присутствуют ли РНК вируса в крови сразу у большого количества пациентов. Конечно, метод имеет свои недостатки, главный — меньшая, нежели у ПЦР, чувствительность. Там, где ПЦР обнаружит присутствие вируса, этот метод может дать отрицательный результат. Поэтому он используется врачами часто в случаях, когда наличие вируса не вызывает сомнений, но существует потребность удостовериться в поставленном диагнозе.

Метод «разветвленной» ДНК (bDNA)

3. Метод ТМА (транскрипционная амплификация) имеет такой же механизм, что и два предыдущих метода, обнаруживает РНК гепатита С в крови. Это самый недорогой и доступный способ узнать о наличии заболевания. Он способен обнаружить даже небольшие концентрации РНК, поэтому активно применяется в диагностике гепатита.

Пределы вирусной нагрузки при гепатите

Насколько больной человек опасен для окружающих определяет концентрация вирусных РНК в организме. Этот показатель также дает ответ на вопрос, насколько эффективным будет медикаментозное лечение. Потому, если обнаружено совсем небольшое число РНК,можно судить о скором выздоровлении человека.

Возвращаясь к результатам с высокой вирусной нагрузкой, отметим, — такой показатель может привести к осложнениям, которые затронут все внутренние органы, а не только печень. Чтобы побороть вирус в активной фазе, когда продолжается заражение здоровых клеток, больному назначают длительный курс комплексной терапии. На протяжении лечения пациент периодически должен проходить тест на определение вирусной нагрузки, чтобы медики были в курсе эффективности одних средств и неспособности противостоять заболеванию других. В соответствии с результатом теста лечение должно корректироваться. Если тест показал положительную динамику и количество РНК уменьшилось, лечение сокращают или переводят пациента на поддерживающую терапию. Безусловно, тест на вирусную нагрузку не может дать объективной картины состояния больного, поэтому должен проводиться в комплексе с другими анализами и диагностическими мерами.

Сроки проведения анализа

Максимум через неделю у пациента окажутся результаты его теста на вирусную нагрузку. Если речь идет о больном, который проходит лечение от гепатита С, то следующий тест ему нужно сделать через месяц; единоразово лабораторный анализ такого типа проводится людям, в крови которых обнаружили антитела; и раз в год при наличии стабильного вирусного ответа. По итогам разных анализов, результат может быть выдан в формате отрицательного или положительного ответа или с указанием конкретного количества РНК вируса.

Также врач может оставить запись «РНК обнаружены ниже диапазона измерений». Это означает, что РНК присутствуют у пациента, но их настолько мало, что используемый метод не смог показать конкретное количество (требуется дополнительная диагностика).

Количественные анализы хороши тем, что помогают врачам определять меру необходимости перехода на следующий этап терапии или надобность что-то в ней поменять. А также позволяют обнаружить людей, которые из-за высокого содержания в крови РНК вируса могут представлять опасность для окружающих.

Анализ сдается натощак, самой информативной является венозная кровь.

Расшифровка

В норме РНК должны отсутствовать в крови. Единица измерения МЕ/мл (количество РНК на миллилитр крови). Что касается расшифровки результатов, то содержанием РНК выше нормы считается показатель от 800 000 МЕ/мл.

Некоторые лаборатории предоставляют результаты следующем виде 4х110 МЕ/мл. В таком случае низкой виремией (содержанием вируса в крови) считается результат от 600 МЕ/мл до 3х104 МЕ/мл, средней от 3х104 МЕ/мл до 8х105 МЕ/мл. А за пределами нормы признается показатель свыше 8х105 МЕ/мл (800 000 МЕ/мл по другой классификации).

Ошибки анализов

Иногда установленные результаты меняются в соответствии с тем, как хранили и обрабатывали забранную на анализ кровь. Особо стоит обратить внимание, что, одна и та же кровь может дать разные результаты в двух лабораториях.

В случае, когда кровь была загрязнена химическими или же белковыми соединениями, гепарином, хранилась ненадлежащим образом, анализ будет неточным или ошибочным.

Для того чтобы лечение по вирусной нагрузке было скорректировано правильно, необходимо периодически посещать лабораторию и сдавать кровь. Ведь именно снижение показателя в период проведения лечения свидетельствует об успешном применении препарата. В таком случае медики говорят, что терапевтический эффект привел к вирологическому ответу.

РНК может начать снижаться уже на третий день терапии, что оперативно покажет тест.

Взятие крови на анализ — фото

Считается, что терапия успешная, если на протяжении лечения показатель вирусной нагрузки снизился хотя бы на две единицы. Если уровень РНК остался на прежнем уровне или даже повысился, скорее всего используемый препарат не поможет избавиться от вирусного гепатита С. Если вирусная нагрузка увеличилась по окончании курса лечения, то скорее всего речь идет о рецидиве. Именно поэтому люди, которые успешно побороли гепатит, должны в дальнейшем периодически сдавать анализ на вирусную нагрузку, чтобы следить за состоянием организма.

Видео — Анализы на гепатит: что нужно знать?

HCV, РНК количественно [реал-тайм ПЦР]

Исследование для выявления возбудителя гепатита C (HCV), в ходе которого с помощью метода полимеразной цепной реакции в реальном времени (РТ-ПЦР) определяется наличие генетического материала (РНК) вируса и его количество (вирусная нагрузка) в образце крови.

РНК HCV может быть обнаружена в концентрации, находящейся за нижней границей линейного диапазона концентраций. Линейный диапазон концентраций – это диапазон, в котором можно точно посчитать количество копий возбудителя. Для данного анализа линейный диапазон концентраций ДНК HCV, определяемых детектирующим амплификатором, составляет 7,5×10 2 – 1,0×10 8 копий/мл образца .

Синонимы русские

Вирус гепатита С (ВГС), количественное определение РНК.

Синонимы английские

Hepatitis C Virus RNA, Quantitative, Real-Time PCR, Blood, HCV Viral Load, Hepatitis C Virus RNA Quant.

Метод исследования

Полимеразная цепная реакция с обратной транскрипцией в режиме реального времени.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Венозную кровь.

Как правильно подготовиться к исследованию?

Не курить в течение 30 минут до сдачи крови.

Общая информация об исследовании

Вирус гепатита С (HCV) – РНК-содержащий вирус из семейства Flaviviridae, который поражает печень. Он способен размножаться в клетках крови (нейтрофилах, моноцитах и макрофагах, В-лимфоцитах) и вызывать криоглобулинемию, болезнь Шегрена и В-клеточные лимфопролиферативные заболевания. HCV благодаря высокой мутационной активности способен избегать воздействия защитных механизмов иммунной системы. Существует 6 генотипов и множество субтипов вируса, которые имеют разные значения для прогноза развития заболевания и эффективности противовирусной терапии.

Основной путь передачи инфекции – через кровь (препараты для переливания элементов крови и плазмы, донорские органы, нестерильные шприцы, иглы, инструменты для татуирования, пирсинга). Вероятно заражение при половом контакте и ребенка от матери во время родов, но это случается нечасто.

Острый вирусный гепатит, как правило, характеризуется бессимптомным течением и остается невыявленным в большинстве случаев. Только у 15 % инфицированных заболевание протекает остро – с тошнотой, ломотой в теле, отсутствием аппетита и потерей веса (редко сопровождается желтухой). У 60-85 % инфицированных развивается хроническая инфекция, что в 15 раз превышает частоту хронизации при гепатите В. Хронический вирусный гепатит С протекает с повышением печеночных ферментов и скудным проявлением симптомов. У 20-30 % больных заболевание приводит к циррозу печени, увеличивая риск развития печеночной недостаточности и гепатоцеллюлярной карциномы.

Выявление РНК HCV свидетельствует о размножении вируса в организме и является методом диагностики заболевания. Генетический материал вируса можно обнаружить с помощью ПЦР через 10-12 дней после инфицирования – в этот период специфические антитела, которые образуются через несколько месяцев после заражения, отсутствуют и биохимические показатели функции печени находятся в пределах референсных значений.

Посредством ПЦР выявляют РНК вируса качественно или количественно. Благодаря качественному методу подтверждается присутствие вируса гепатита С и его активное размножение. Количественное определение вирусной нагрузки с учетом генотипа HCV позволяет контролировать проводимую терапию и прогнозировать течение болезни.

Эффективность лечения оценивается по количеству РНК до и во время терапии. Обычно вирусная нагрузка крови снижается в несколько раз за первые три месяца успешного лечения. При эффективной терапии виремия уменьшается на два порядка в первые 4-12 недель лечения и после окончания курса терапии генетический материал вируса в крови не обнаруживается. Отсутствие снижения виремии через 12 недель с начала лечения указывает на его неэффективность. Рекомендовано проводить анализ до начала терапии, на 4-й, 12-й и 24-й неделях лечения и через 24 недели после окончания курса. Длительность терапии и периодичность количественного определения РНК вируса гепатита С зависит от генотипа вируса и степени повреждения печени.

Для чего используется исследование?

Для подтверждения диагноза «вирусный гепатит С».
Для прогнозирования течения вирусного гепатита С.
Для мониторинга противовирусной терапии и решения вопроса о дальнейшей тактике лечения.

Когда назначается исследование?

При качественном обнаружении РНК вируса гепатита С.
При остром и хроническом вирусном гепатите С.
При микст-гепатитах.
При планировании, во время и после окончания противовирусной терапии.

Что означают результаты?

Не обнаружено – РНК вируса гепатита С не обнаружена или значение ниже предела чувствительности метода (200 копий/мл = 400 МЕ/мл).
> 2*10^6 копий/мл (>4*10^6 МЕ/мл) – РНК вируса гепатита С обнаружена. Высокая виремия.
>1,0*10^8 копий/мл (>2*10^8 МЕ/мл) – РНК вируса гепатита С обнаружена в концентрации выше линейного диапазона концентраций.

Линейный диапазон концентраций РНК вируса гепатита С, определяемых детектирующим амплификатором, составляет 7,5*10^2 – 1,0*10^8 копий/мл (1,5*10^3 – 2*10^8 МЕ/мл).

Что может влиять на результат?

Недостоверный результат может быть получен при:

загрязнении биоматериала;
наличии в образце ингибиторов – химических и белковых субстанций, влияющих на различные компоненты ПЦР;
присутствии в крови гепарина.

Важные замечания

Уровень вирусной нагрузки крови не указывает на степень повреждения печени и тяжесть заболевания. Для их оценки необходимо исследовать биохимические показатели и материалы биопсии.
При планировании лечения очень важно определить генотип вируса гепатита С.

Anti-HCV, антитела, ИФА
Аnti-HCV, антитела
Антитела к структурным и неструктурным белкам вируса гепатита

Гепатит С - воспаление клеток печени, возникающее вследствие инфицирования вирусом HCV (гепатита С) посредством контакта с кровью зараженного человека. Генетический код флавивируса HCV несет молекула РНК (рибонуклениновой кислоты), содержащаяся в структуре вируса. Это опасное для жизни пациента явление отличает скрытность на начальной стадии патологии. Временной интервал между инфицированием и появлением симптомов (реагирования иммунной системы) может составлять от одного месяца до полугода. Как правило, болезнь принимает хроническую форму и трудно поддается излечению.

Современная медицина позволяет диагностировать патологию при незначительном поражении печени. К самым распространенным и эффективным методам диагностики относится анализ ПЦР. Рассмотрим в данной статье, что это такое и какие его разновидности существуют.

Что представляет собой исследование

Анализ ПЦР на гепатит С - обследование в условиях лаборатории, выявляющее флавирус – генетический материал вируса рибонуклениновой кислоты (РНК). Оно определяет количество молекул РНК в крови, качество биологического материала, генетический тип флавируса HCV.

Метод ПЦР при гепатите С позволяет обнаружить минимальное количество флавируса еще до формирования антител, как правило, вскоре после инфицирования.

Исследование часто именуют РНК-анализ, так как он выявляет частицы рибонуклеиновой кислоты, имеющие размер 30-60 нм, содержащиеся в флававирусе.

Исследование проводится следующим образом: натощак пациент сдает кровь из вены, которая потом тестируется разными методами:

Real-Time PCR проводится закрытым автоматизированным способом и имеет нижний лимит выявления вируса РНК, равный 15 МЕ/мл;
COBAS AMPLICOR с сенситивностью 50-100 МЕ/мл.

Чем выше порог чувствительности у диагностической методики, тем больше шансов обнаружить самое минимальное содержание вируса в исследуемом биологическом материале.

Какие разновидности анализа используют

Анализ, успешно применяемый уже несколько десятков лет называется ПЦР гепатит при этом выявляется достаточно просто и быстро. В медицине различают две методики проведения реакции, принципиально отличающиеся друг от друга:

качественный метод выявляет наличие в биологическом материале генетического источника определенного вируса;
количественный анализ измеряет число генетической материи, позволяющее определить стадию патологии или оценить эффективность проводимого терапевтического курса;
генотипирование определяет тип вируса, присутствующего в организме.

В целом анализ крови помогает выявить характер вирусемии и генетический тип возбудителя. Как правило, исследование проводится 1 раз в зависимости от степени чувствительности диагностической системы. При необходимости проводят повторное тестирование, используя ультрачувствительный реагент.

Качественный ПЦР

Что такое качественный ПЦР РНК на гепатит С? Суть реакции заключается в присутствии последовательности РНК гепатита, причем выполнение реакции возможно лишь в случае присутствия вирусных белков схожей этимологии в ИФА. В процессе сравнения выявляется нагрузка и возможное поражение области печени.

Отличительной особенностью данного метода является способность выявить даже наличие отдельного гена.

Следует отметить, что после получения результатов исследования ПЦР и ИФА, пациенту требуется соответствующее лечение, независимо от того, каким оказался итоговый иммуноферментный результат. Положительный свидетельствует об инфицировании, а ПЦР отрицательный - о сниженном количестве вирусных частиц относительно уровня чувствительности.

Существует несколько условий, влияющий на получение отрицательного показателя ПЦР и ИФА:

отсутствие соответствующих условий забора материала;
в полученном анализе присутствуют загрязнения;
в случае раннего введения пациенту инъекций гепарина.

Со стороны больного не требуется соблюдения определенных правил по забору крови на ПЦР анализ, в данном случае качество этого анализа зависит от медицинского работника, проводящего процедуру. Возможность установить присутствие заболевания (особенно в острой форме) появляется уже через несколько недель после инфицирования.

Количественный анализ

Количественный тест рекомендуется проводить для выявления вирусной нагрузки непосредственно перед формированием дальнейшей терапии и реакцией организма. Процесс забора крови проводится аналогичным образом, что при качественном ПЦР и ИФА, единственным условием является отсутствие возможности курения пациента перед процедурой.

Что касается характеристики полученных в результате изучения данных, то повышенная нагрузка характеризуется показателями от 800000 МЕ/мл, низкий - 400000 МЕ/мл. О присутствии вируса в организме пациента говорит ПЦР на гепатит не отрицательный качественный тест.

Подобного рода исследование дает возможность определить, насколько пациент опасен для окружающих его людей. Так, например, выявление высокого уровня говорит о повышенной заразности пациента. К тому же результаты анализа помогают сформировать дальнейшее наиболее эффективное лечение и определить, на сколько имеющаяся терапия считается действенной.

Быстрый отрицательный ответ тестов говорит об успешности выбранной методики, а медленное - о необходимости корректировки и использования разностороннего лечения.

Процесс проведения процедуры взятия анализа зависит от определенного дня течения заболевания. Первое определение проводится в первые сутки после поступления пациента в стационар, далее процедура повторяется на 4, 12 и 24 неделе после того, как был начат прием лекарственных средств.

Таким образом, количественный анализ показывает, какое лечение является наиболее эффективным, длительность имеющейся терапии и опасность пациента по отношению к другим людям.

Генотипирование

При исследовании материала анализа важно определить точность того генотипа вируса, который имеет место быть. В настоящее время существует 11 разновидностей вируса гепатита С, которые в свою очередь включают в себя определенные подвиды.

Все эти виды по-разному реагируют на различные способы лечения, при этом отдельные разновидности абсолютно устойчивы ко многим лекарственным препаратам.

Генотип дает возможность определить и показать состояние печени. Нередки случаи, когда в результатах записывается «не типируется», что означает, что вирус, находящийся в крови пациента не определяется данной тестовой системой. Подобное может быть выявлено в случае, если определенный генотип не соответствует данной зоне. В подобной ситуации забор анализа осуществляется повторно, при этом для исследования материала используется более чувствительная система.

Ультрачувствительный метод

Ультрачувствительный метод необходим в определенных случаях, когда диагностика гепатита не может осуществляться посредством других методов, при этом, когда сдавать анализ определяется лечащим врачом:

при подозрении присутствия вируса гепатита С у больных, имеющих скрытую разновидность заболевания;
присутствие антител относительно вируса гепатит С, не подтвержденный ПЦР-диагностикой;
с целью определения качества эффективности выбранной методики лечения, и подтверждения факта устранения заболевания.

Чувствительность данного метода значительно выше тех, которые обычно применяются, однако и этот метод не исключает получение ложных результатов, причем как положительных, так и отрицательных. В подобной ситуации важно контролировать качество проведения процедуры и возможность загрязнения самого материала.

Расшифровка анализа ПЦР

Расшифровка анализа проводится на основе представленных материалов, при этом в результаты лабораторных исследований включаются определенные данные, описанные выше.

Расшифровка может включать в себя выявление в анализе положительный ПЦР полимеразной цепной реакции и отрицательного значения ИФА значит, что у пациента в крови отсутствуют признаки гепатита С, однако в прошлом он перенос острую форму данного заболевания. Как правило, при диагностике специалисты прибегают к использованию именно показателей тестов ПЦР.

Подводя итог всему вышесказанному, можно сделать вывод о том, что при проведении анализа важно соблюдать все правила и рекомендации, чтобы полученные результаты были максимально точными, а на основе полученных данных можно было определить эффективность использующейся терапии и дальнейший шанс на полное выздоровление.

Государство